Тест-системы RIDASCREEN ^® Clenbuterol и RIDASCREEN ^® Clenbuterol FAST

Наборы RIDASCREEN ^®Clenbuterol и RIDASCREEN ^®Clenbuterol FAST представляют собой тест-системы для ИФА в комплекте с необходимыми реагентами и предназначены для обнаружения сверхмалых остаточных концентраций кленбутерола и других β-агонистов в мясе, почках, печени, молоке, моче, плазме/сыворотке крови, глазном яблоке, кормах и волосах. Методика утверждена Департаментом ветеринарии Минсельхоза России за номером МУК 13-7-2/ 1868.

Тест-система RIDASCREEN ^® Clenbuterol FAST включена в "Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения".

Определение кленбутерола и других β-агонистов в мясе, почках, печени, молоке, моче, плазме/сыворотке крови, глазном яблоке, кормах и волосах

Кленбутерол принадлежит к группе веществ, называемых β-агонистами. Известно, что β-агонисты стимулируют рост мышечной массы и регулируют соотношение жировой и мышечной ткани при выращивании сельскохозяйственных животных и птицы. Было, однако, показано, кленбутерол и другие β-агонисты при их потреблении с пищей могут спровоцировать тахикардию и резкий подъем кровяного давления. При хроническом поступлении кленбутерола и других β-агонистов в организм человека могут наблюдаться нарушения обмена веществ. Использование кленбутерола и других β-агонистов в животноводстве и птицеводстве приводит к их накоплению в продуктах животного происхождения и запрещено как в Российской Федерации, так и в странах Евросоюза.

Для определения β-агонистов используются инструментальные физико-химические методы анализа, такие как жидкостная хроматография высокого давления (ВЭЖХ, ГХ-МС). Эти методы, однако, предусматривают использование дорогостоящего оборудования, нуждающегося в высококвалифицированном обслуживании.

Метод ИФА выгодно отличается высокой чувствительностью, специфичностью, доступностью, простотой запуска и поддержки.

Спецификация:

RIDASCREEN ^®Clenbuterol FAST (R1701)

RIDASCREEN ^® Clenbuterol (R1711)

Формат:

Стрипованный планшет, 96 лунок (12 стрипов по 8 лунок)

Стандарты:

0 /100 / 300 / 900 / 2700 нг/л

0 / 75 / 150 / 900 / 2700 мкг/л

Пробоподготовка:

Моча, плазма: без пробоподготовки
Мясо, почки, печень: очистка на колонках RIDA ® C18
Волосы: отмывка, размол, экстракция, центрифугирование, нейтрализация, очистка на колонках RIDA ® C18
Глазное яблоко: гомогенизация, очистка на колонках RIDA ® C18

Молоко: без пробоподготовки
Мясо: гомогенизация, экстракция, выпаривание
Печень: гомогенизация, экстракция, обработка реактивом RIDA^® Sample Decolorant (R1699)
Почки: гомогенизация, экстракция
Моча, плазма, сыворотка крови: без пробоподготовки
Волосы: отмывка, кипячение
Глазное яблоко: измельчение, экстракция
Корм для животных: размол, экстракция, обработка реактивом RIDA® Sample Decolorant (R1699)

Затраты времени:

Пробоподготовка:

моча, плазма, сыворотка крови:	10 мин
мясо, почки, печень:	около 6 часов
глазное яблоко:	около 30 мин.
волосы:	около 18 часов
молоко:	около 6 часов (А) или 4 часов (Б)
Анализ:	около 1 часа

Длительность инкубации: 1 час

Предел обнаружения:

моча:	0,2 мкг/л
плазма, сыворотка крови:	0,1 мкг/л
мясо, почки, печень:	0,04 мкг/кг
глазное яблоко:	<0,5 мкг/кг
волосы:	1 мкг/кг
молоко:	0,05 мкг/л (метод А) или 0,135 мкг/л (метод Б)

молоко:	50 нг/л
мясо:	100 нг/кг
печень:	150 нг/кг
почки:	200 нг/кг
моча:	100 нг/л
плазма, сыворотка:	250 нг/л
волосы:	2 мкг/кг
глазное яблоко:	200 нг/кг
корм	600 нг/кг

Перекрестная чувствительность

Кленбутерол: 100%
Мабутерол: 95%
Бромбутерол: 87%
Бромхлорбутерол: 85%
Тербуталин: 23%
Сальбуматол: 20%
Карбутерол: 15%
Адреналин, Болденон, Циматерол, Кленпроперол, Изопротеренол, Фенилбутазон, Рактопамин, Триамцинолон гексацетонид, Зильпатерол: < 1%

Схема определения кленбутерола в мясе с помощью тест-системы RIDASCREEN ^® Clenbuterol FAST:

Измельчение пробы	1–2 минуты
Экстракция 5 г навески с 25 мл 0,05 М буферного раствора трис	30 минуты
Обезжиривание с 15 мл н-гептана	5 минут
Центрифугирование	5 минуты
Повторное обезжиривание и центрифугирование	12 минут
Закисление соляной кислотой	1 час
Центрифугирование	15 минут
Защелачивание супернатанта 300 мкл 1 М раствором гидроксида натрия	15 минут
Добавление 4 мл 0,5 М раствора дигидрофосфата калия и инкубация при температуре 4°С	минимум 1,5 часа
Центрифугирование	15 минут
Доведение до комнатной температуры	1 час
Очистка методом твердофазной экстракции	30 минут
Постановка иммуноферментной реакции	1 час
Считывание результатов на ИФА-фотометре (450 нм) или визуально. Обработка результатов анализа	30 секунд